2 ـ 2 ـ ادماج المورثة داخل الناقل:
يمكن استعمال البلاسميد البكتيري كناقل كما يمكن استعمال ADN العاتيات(فيروسات تتطفل على البكتيريات).
يتم تقطيع البلاسميد الناقل بواسطة نفس أنزيم الفصل المستعمل لعزل
المورثة المرغوب فيها، هذه الاخيرة تدمج مع البلاسميد باستعمال انزيمات
الربط.
2 ـ 3 ـ نقل وتلميم المورثة:
يتم نقل
البلاسميد المغير إلى البكتيريا ثم تزرع في اوساط زرع ملائمة ويعاد الزرع
عدة مرات للحصول على لمات من البكتيريا المغيرة (تلميم) تتوفر على المورثة
المرغوب فيها.
Zيؤدي التكاثر البكتيري الى تكاثر البلاسميدات ومعها تتكاثر المورثات.
2 ـ 4 ـ رصد البكتيريات المعدلة وراثيا:
للتعرف
على البكتيريات المغيرة وراثيا، تستعمل مجسات مشعة ترتبط بالمورثة
المرغوب فيها، ويتم رصد البكتيريات الحاملة لهذه المورثات بواسطة تقنية
التصوير الإشعاعي الذاتي.
أو عن طريق استعمال مورثة المقاومة لمضاد حيوي معين:
2 ـ 5 ـ تعبير المورثة المنقولة وتوظيفها لإنتاج المادة المرغوب فيها:
تزرع البكتيريات المغيرة لإنتاج واستخلاص المادة المرغوب فيها حيث تصبح جاهزة للاستعمال.
4 ـ بعض تطبيقات الهندسة الوراثية
أ ـ بكتيريات تركب:
الأنسلين، هرمون النمو، عوامل التجلط، أنزيمات تحلل بعض المواد الملوثة كالنفط، بروتينات مصنعة لا توجد في الطبيعة ...
1- الإنتاج الصناعي للأنسولين:
الأنسولين
هرمون مخفض لتحلون الدم أي نسبة السكر في الدم، تفرزه خلايا B لجزيرات
Langerhans البنكرياسية ويتكون من 51 حمض أميني على شكل سلسلتين:
السلسلة A بها 21 حمض أميني و السلسلة B بها 30 حمض أميني.
تنتج
بعض انواع مرض السكري عن اضطراب في إفراز هذا الهرمون. لهذا يحتاج
المصابون بالمرض إلى كميات أكبر من الأنسولين.حيث استعمل في اول الأمر
الهرمون الحيواني(الأبقار والخنازير) لكن استعماله كان يطرح عدة مشاكل
كالحساسية وعدم تقبله من طرف جسم الإنسان.
لقد مكنت الهندسة الوراثية انظر الرابط من إنتاج أنسولين بشري وبوفرة ذلك بنقل مورثة الأنسولين البشرية الى البكتيريا التي تصبح قادرة على إنتاجه. 2- الإنتاج الصناعي لهرمون النمو:
هذا
الهرمون مسؤول عن نمو القامة عند الإنسان، يفرز من طرف الغدة النخامية
المتواجدة أسفل الدماغ .إذا توقف إفرازه يبقي الإنسان قزما . GH عبارة عن
بروتين مكون من191 حمض أميني. استطاع العلماء استخلاصه من الغدد
النخامية للأبقار سنة 1944 لكن استعماله لدى الإنسان للمعالجة لم يكن
موفقا نظرا لبعض الاختلاف مع الهرمون البشري. بفضل الهندسة الوراثية
استطاع الباحثون إنتاج هرمون النمو GH بنفس التركيبة البشرية ذلك عن طريق
البكتيريا E .Coli التي أخضعت للتغيير الوراثي المقصود .فيما يلي بعض
المراحل التي اتبعت من أجل ذلك :